CUT-Tag技術服務-研究DNA與蛋白互作

CUT-Tag互作技術服務-研究DNA與蛋白互作（Cleavage Under Targets and Tagmentation）是研究DNA與蛋白互作的新技術。與ChIP-Seq相比，CUT&Tag不需要甲醛交聯和免疫共沉淀的過程，而是通過靶蛋白的抗體和Protein A的介導，使Protein A融合的Tn5轉座酶靶向并切割DNA，同時在序列兩端加上測序接頭，經PCR擴增后形成高通量測序文庫。

（CUT-Tag互作技術服務-研究DNA與蛋白互作）實驗流程圖

細胞與ConA beads結合——細胞滲透性處理——一抗與目的蛋白特異性結合——二抗結合一抗放大信號——加入pA-Tn5與抗體結合——通過Mg2+激活轉座體，片段化目的蛋白結合的DNA，并加上接頭序列——DNA提取與擴增-高通量測序

使用CUT&Tag，鑒定H3K27me3在染色質水平上的peaks。與ChIP-seq相比，在相同Reads條件下，兩者的Peaks一致，并且CUT&Tag的信噪比更高、背景更低。

參考文獻：

Kaya-Okur HS, Wu SJ, Codomo CA, Pledger ES, Bryson TD, Henikoff JG, Ahmad K, Henikoff S. CUT&Tag for efficient epigenomic profiling of small samples and single cells. Nat Commun. 2019 Apr 29;10(1):1930. doi: 10.1038/s41467-019-09982-5.